-
-
實(shí)驗(yàn)服務(wù)
-
新聞資訊
原理： 免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。
免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。 結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。
2 免疫印跡westernblot服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程：
◎ 細(xì)胞及組織蛋白質(zhì)抽提； ◎ 蛋白質(zhì)定量； ◎ 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE)； ◎ 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜； ◎ 膜的封閉； ◎ 一抗、二抗孵育； ◎ 結(jié)果檢測(cè)：化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，X 膠片曝光顯影； ◎ 數(shù)據(jù)分析；
2 免疫印跡westernblot技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)要求：
1. 客戶需自備一抗，本公司可代為購(gòu)買(mǎi)一抗。
2. 標(biāo)本盡可能新鮮；標(biāo)本量：組織塊大于100mg；細(xì)胞數(shù)大于6×106。
3. 技術(shù)部將在收到標(biāo)本后20-30個(gè)工作日之內(nèi)提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以數(shù)據(jù)和圖片的 形式提交給客戶。
標(biāo)本收集及注意事項(xiàng)：
對(duì)于組織樣品： 采集新鮮組織，離體時(shí)間盡量不超過(guò)15分鐘，用錫箔紙包埋或者放入凍存管中，先放入液氮中速凍幾個(gè)小時(shí)或者過(guò)夜，再放入-80度冰箱或液氮保存。
細(xì)胞樣品：
1、貼壁細(xì)胞：取大約1*107個(gè)貼壁細(xì)胞，胰酶消化后加入PBS懸浮細(xì)胞，低速離心收集，棄去液體，加入適量的PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入離心管中，低速離心沉淀細(xì)胞，棄去PBS，放入液氮中速凍，然后轉(zhuǎn)入-80度冰箱保存。 2、懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液，加入適量PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細(xì)胞，棄去PBS，放入液氮中速凍，然后轉(zhuǎn)入-80度冰箱保存。