分類:動物實(shí)驗(yàn) 發(fā)布時間 閱讀: 361
一、技術(shù)簡介:
1.膿毒癥(sepsis)是指由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS),臨床上證實(shí)有細(xì)菌存在或有高度可疑感染灶。雖然膿毒癥是由感染引起,但是一旦發(fā)生后,其發(fā)生發(fā)展遵循其自身的病理過程和規(guī)律,故從本質(zhì)上講膿毒癥是機(jī)體對感染性因素的反應(yīng)。
2.葡聚糖硫酸鈉(DSS)造模:DSS既可以單獨(dú)使用或與其他化學(xué)物質(zhì)一起使用,以誘導(dǎo)炎癥。通過調(diào)整DSS的使用濃度和持續(xù)時間的決策支持治療,可以研究急性和慢性炎癥的機(jī)制。DSS誘導(dǎo)炎癥通過破壞上皮屏障,將固有層暴露于管腔內(nèi)容物和細(xì)菌抗原引起血管和粘膜損傷,這種曝光觸發(fā)炎癥通路的活化導(dǎo)致炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)量增加。
二、實(shí)驗(yàn)流程:
1. 膿毒癥造模:
(1)實(shí)驗(yàn)動物:選擇 SD 大鼠,體重(190-210g),于實(shí)驗(yàn)前禁食12h,不禁水。
(2)實(shí)驗(yàn)當(dāng)日用實(shí)驗(yàn)室電子稱稱大鼠體重,稱重后10%水合氯醛溶液按照(0.4ml/100g)的劑量腹腔注射麻醉動物,麻醉5min后,動物予以適當(dāng)疼痛刺激,監(jiān)測麻醉效果及評估麻醉是否成功。
(3)將麻醉成功的動物,記錄此時(定義為 0min)實(shí)驗(yàn)動物血壓值為實(shí)驗(yàn)動物基線數(shù)值。
(4)于腹中線處切開實(shí)驗(yàn)動物腹壁,約1.5cm切口后,暴露腹腔,實(shí)驗(yàn)組(S 組)動物找到盲腸后,將盲腸輕輕拉出腹腔,期間應(yīng)避免損傷腸系膜血管,將盲腸的糞便部分?jǐn)D至盲腸末端使其充盈,用無菌結(jié)扎線在盲瓣與盲腸中點(diǎn)進(jìn)行結(jié)扎,用 5ml一次性使用無菌注射器針頭貫穿性刺穿盲腸,共3次,自穿此處擠出少許盲腸分泌物后,將盲腸放入腹腔,逐層關(guān)閉腹腔;對照組( D 組)動物,切開腹腔后,盲腸暴露 1min,不予盲腸結(jié)扎穿孔,直接關(guān)閉腹腔。術(shù)后 5%葡萄糖溶液(按照 0.5ml/100g/h)經(jīng)微量泵由頸總靜脈留置針輸入動物體內(nèi),維持動物能量。
(5)觀察實(shí)驗(yàn)動物血壓,待實(shí)驗(yàn)動物血壓(MAP)較基線值下降 20%后,定義實(shí)驗(yàn)組動物膿毒癥模型成立。觀察實(shí)驗(yàn)動物血壓,每 2 小時記錄一次。
2. DSS腸炎造模:
A. 小鼠慢性炎癥
DSS造模,在兩個月內(nèi),使用1周DSS,休息2周,循環(huán)進(jìn)行。
B. 小鼠急性炎癥:
連續(xù)灌胃濃度為1.5%的DSS約為1周,在腸道內(nèi)引起急性炎癥。
三、結(jié)果說明:
1. 客戶提供:治療藥物。
2.動物造模-給藥治療-組織取材-指標(biāo)檢測,實(shí)驗(yàn)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析報(bào)告。
3.實(shí)驗(yàn)周期:10個工作日。
四、聯(lián)系方式:
電話:400-681-8582