操作說明
貼壁細(xì)胞
1. 吸去細(xì)胞培養(yǎng)液,用無菌的PBS或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞去除殘余的血清。
2. 加入適量本產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞,室溫靜置消化1-5 min。
3. 顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮(用移液槍輕輕吹打細(xì)胞較容易將細(xì)胞吹打下來),吸除胰酶細(xì)胞消化液,加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,即可直接傳代培養(yǎng)。如果用移液槍輕輕吹打時很難使細(xì)胞從板底脫落,表明消化時間不夠,可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。注意避免過度消化
注意事項
1. 由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實驗人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定最佳消化時間;消化細(xì)胞時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況。
2. 本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染。
3. 本產(chǎn)品不宜4℃長期保存,避免反復(fù)凍融,建議分裝成小份后-20℃保存。
4. 對于胰酶中EDTA、酚紅的選擇,可以根據(jù)實驗需要,對于一般的腫瘤細(xì)胞,選擇含EDTA的胰酶消化液。對于較敏感、脆弱的細(xì)胞,例如原代細(xì)胞及很容易消化的細(xì)胞,選擇不含EDTA的胰酶消化液,如果細(xì)胞特別敏感,需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,則選用不含EDTA的胰酶消化液。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。