貨號：U22-420A
檢測物種：
應用范圍： 細胞培養(yǎng)
產(chǎn)品類型：
保存溫度： 常溫保存，兩年有效；拆封后請置于 4℃避光保存，一個月內使用
產(chǎn)地： YOBIBIO
【產(chǎn)品簡介】： 本產(chǎn)品是一種用于分離淋巴細胞的無菌、低內毒素水平的密度梯度分離液。人血中紅細胞 和粒細胞密度較大，為 1.090 g/mL 左右，淋巴細胞和單核細胞密度為 1.075~1.090 g/mL，血小 板為 1.030~1.035 g/mL。為此利用一種密度介于 1.075～1.092 之間而近于等滲的溶液做密度梯 度離心，使一定密度的細胞按相應密度梯度分布，從而將各種血細胞加以分離。
【操作方法】（常規(guī)方法，僅供參考）：
1、用 2-4 倍體積生理鹽水、PBS 或 Hank’s 等無菌稀釋液稀釋血液樣品。
2、在離心管中加入 15-20mL 分離液，小心將稀釋后的血樣 20-30mL 平鋪到分離液液面上 方。
3、室溫離心 400 g，15-30 min。
4、離心結束后，此時離心管中由上至下細胞分四層：第一層為血漿層，第二層為環(huán)狀乳 白色淋巴細胞（目的細胞），第三層為透明分離液層，第四層為紅細胞層。
5、小心吸取第二層細胞到另一離心管中，加入三倍體積的生理鹽水、PBS 或 Hank’s 液等 無菌稀釋液混勻，300g，離心 10min，棄上清。
6、為了去除殘余血小板，可將細胞重懸于 30-50mL 生理鹽水、PBS 或 Hank’s 液等無菌 稀釋液中，室溫 200g 離心 10-15 分鐘，小心棄掉上清。
7、可選擇性地重復第 6 步，將會去除絕大部分血小板。
8、用適當體積的后續(xù)實驗所需相應液體重懸目的細胞，進行后續(xù)實驗。
【注意事項】：
1、在實驗過程中樣本、試劑及實驗環(huán)境均應在 22±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實 驗結果，最好在取血 2h 內進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
2、本實驗最好不要使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品，應使用無靜電、低靜電 離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變 成毛面，影響細胞分離效果。
3、吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的 粒細胞數(shù)量增加；吸取過多的淋巴細胞層上層溶液會導致血漿蛋白及血小板混雜。
4、因血液樣本的個體差異及血液粘度不同，使用本試劑得到的分離效果也會有一定差異， 可根據(jù)實際情況調整離心力及離心時間，離心力最大不超過 1000g。
保存條件： 常溫保存，兩年有效；拆封后請置于 4℃避光保存，一個月內使用。
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