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實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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新聞資訊
三標(biāo)多重免疫熒光試劑盒
【產(chǎn)品原理】
酪酰胺信號(hào)放大(TSA，Tyramide signal amplification)技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對(duì)靶 蛋白進(jìn)行標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法，類似常規(guī)免疫組化的 DAB 顯色方法，TSA 技術(shù)同樣采用 HRP 標(biāo)記 的二抗，同樣有對(duì)應(yīng)的“顯色 ”步驟（HRP 催化加入反應(yīng)體系的酪胺熒光素底物，產(chǎn)生活化熒光底 物，活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價(jià)結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合酪胺熒光素。之后用 熱修復(fù)法洗去非共價(jià)結(jié)合的一抗-二抗-HRP 復(fù)合物，重復(fù)下一種一抗-HRP 二抗來第二輪孵育，換另 一種酪胺熒光素底物，如此往復(fù)就可實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。
TSA 詳細(xì)原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在 HRP 催化 H202 下形成共價(jià)鍵結(jié)合位 點(diǎn)) ，產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物，該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合， 這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的熒光素沉積，結(jié)果使其檢測信號(hào)得到 10- 100 倍增強(qiáng)。簡單來說， 用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入 體系的非活性熒光素。熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶 聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波或煮沸或者水浴等熱修復(fù)處理，前一輪非共價(jià)結(jié)合 的抗體被洗掉，共價(jià)結(jié)合的熒光素穩(wěn)定共價(jià)結(jié)合在樣本切片蛋白上。再換個(gè)一抗來第二輪孵育，周 而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，最后去檢測結(jié)果。 由于每次體系中都只有單 一抗體孵育，因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng)， 以及一抗二抗種屬匹配問題，大大減少了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)不 同種屬抗體選擇匹配的限制。也就是說，如果用 TSA 技術(shù)，同一張片子上所有的靶標(biāo)都可以選用特 異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的多聚 HRP 二抗就可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而且信號(hào)放大的倍數(shù)大 大增強(qiáng)。本公司開發(fā)的試劑盒具體酪胺熒光染料為以下其中一種或者多種：TYR-480 ，TYR-520 ， TYR-570 ，TYR-620 ，TYR-690 ，TYR-780 。此試劑盒中的熒光染料可單獨(dú)或配合使用�？梢詫�(shí)現(xiàn)單標(biāo)、雙標(biāo)、三標(biāo)以及更多重?zé)晒夥糯?多重同源抗體熒光標(biāo)記等功能，極大豐富了此試劑盒的內(nèi)涵。
【產(chǎn)品規(guī)格】 100T
【產(chǎn)品貨號(hào)】 YB006
【儲(chǔ)存溫度】 -20℃ , 一年有效
【產(chǎn)品組成】
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名稱 |
規(guī)格 |
保存條件 |
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TYR-520 熒光染料 |
5ml（即用型） |
-20℃ |
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TYR-570 熒光染料 |
5ml（即用型） |
-20℃ |
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TYR-690 熒光染料 |
5ml（即用型） |
-20℃ |
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TSA+增強(qiáng)劑 |
10μl*3 |
-20℃ |