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產(chǎn)品與服務(wù)

PRODUCTS

雙標多重免疫熒光試劑盒

貨號:YB005
檢測物種:
應(yīng)用范圍: 免疫組化
產(chǎn)品類型: 免疫組化試劑盒
保存溫度: -20°C
產(chǎn)地: YOBIBIO

雙標多重免疫熒光試劑盒

【產(chǎn)品原理】

酪酰胺信號放大(TSA,Tyramide signal amplification)技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白進行標記的酶學(xué)檢測方法,類似常規(guī)免疫組化的 DAB 顯色方法,TSA 技術(shù)同樣采用 HRP 標記 的二抗,同樣有對應(yīng)的“顯色 ”步驟(HRP 催化加入反應(yīng)體系的酪胺熒光素底物,產(chǎn)生活化熒光底物,活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結(jié)合,使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合酪胺熒光素。之后用 熱修復(fù)法洗去非共價結(jié)合的一抗-二抗-HRP 復(fù)合物,重復(fù)下一種一抗-HRP 二抗來第二輪孵育,換另一種酪胺熒光素底物,如此往復(fù)就可實現(xiàn)多重標記。

TSA 詳細原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在 HRP 催化 H202 下形成共價鍵結(jié)合位點) ,產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物,該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合,這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的熒光素沉積,結(jié)果使其檢測信號得到 10-100倍增強。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波或煮沸或者水浴等熱修復(fù)處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素穩(wěn)定共價結(jié)合在樣本切片蛋白上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,最后去檢測結(jié)果。 由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng), 以及一抗二抗種屬匹配問題,大大減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。也就是說,如果用 TSA 技術(shù),同一張片子上所有的靶標都可以  選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的多聚 HRP 二抗就可以進行實驗,而且信號放大的  倍數(shù)大大增強。本公司開發(fā)的試劑盒具體酪胺熒光染料為以下其中一種或者多種:TYR-480,TYR-520, TYR-570 ,TYR-620 ,TYR-690 ,TYR-780 。此試劑盒中的熒光染料可單獨或配合使用。可以實現(xiàn)單標、雙標、三標以及更多重?zé)晒夥糯?多重同源抗體熒光標記等功能,極大豐富了此試劑盒的內(nèi)涵。

【產(chǎn)品規(guī)格】100T

【產(chǎn)品貨號】YB005

【儲存溫度】-20℃ , 一年有效

【產(chǎn)品組成】

名稱

規(guī)格

保存條件

TYR-520  熒光染料

5ml(即用型)

-20℃

TYR-570  熒光染料

5ml(即用型)

-20℃

TSA+增強劑

10μl*2

-20℃

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