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實驗服務

EXPERIMENTAL SERVICE

染色質共沉淀CHIP實驗

分類:分子實驗   發(fā)布時間    閱讀: 338
技術簡介:
核酸和蛋白質是組成生命的主要生物大分子,兩者的相互作用是構成生命活動的生長、繁殖、運動、遺傳和代謝等生命活動的基礎。研究蛋白質和核酸間的相互作用是人們探索生命現(xiàn)象奧秘的關鍵,CHIP檢測實驗是應用于蛋白與核酸互作關系的重要參考。CHIP實驗在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。將ChIP與第二代測序技術相結合的ChIP-Seq技術,能夠高效地在全基因組范圍內(nèi)檢測與組蛋白、轉錄因子等互作的DNA區(qū)段,研究體內(nèi)轉錄因子和靶基因啟動子區(qū)域直接相互作用的方法,對于調(diào)控蛋白在基因組上的結合靶點篩選、差異化表觀遺傳變異的原理揭示提供了重要的解決思路。
實驗步驟:
Step1:細胞培養(yǎng)物交聯(lián)和樣品制備。
Step2:胞核制備和染色質消化。
Step3:染色質消化和濃度分析。
Step4:染色質免疫沉淀法。
Step5:將染色質從抗體/Protein G Magnetic Beads上洗脫下來并解交聯(lián)。
Step6:使用離心柱純化 DNA。
Step7:用PCR定量 DNA。

結果展示:

送樣要求:
目的基因或轉錄因子的相關背景資料。
動物:細胞系、低脂肪含量組織液氮速凍樣本(細胞數(shù)大于5×106個)。
抗體:進口IP級別抗體/非商業(yè)化標準抗體(需檢測)。
樣品運輸:干冰運輸,建議用滅菌的樣品袋或LoBind 管,parafilm將管口密封好。
實驗周期:2周
聯(lián)系方式:400-681-8582