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實(shí)驗(yàn)服務(wù)

EXPERIMENTAL SERVICE

雙熒光素酶報(bào)告基因檢測

分類:分子實(shí)驗(yàn)   發(fā)布時(shí)間    閱讀: 375
1.服務(wù)簡介:
熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase) 活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成 oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。
2.服務(wù)內(nèi)容:
(1). 驗(yàn)證miR同mRNA靶向互作。將待測mRNA的預(yù)測靶向序列插入報(bào)告基因載體,再共轉(zhuǎn)入該miR mimics,如果螢光素酶活性下降,則提示為其靶序列。
(2). 驗(yàn)證miR同lncRNA靶向互作。將候選的lncRNA預(yù)測靶向序列插入報(bào)告基因載體中F-Luc的3’UTR區(qū)域,檢測螢光素活性。
(3). 啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)分析。將啟動(dòng)子區(qū)域序列(通常2k左右)進(jìn)行分段截短,或?qū)μ囟ㄎ稽c(diǎn)進(jìn)行突變,再分別構(gòu)建入luciferase報(bào)告載體中替換啟動(dòng)子序列,檢測其啟動(dòng)子活性。
(4). 驗(yàn)證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用。將該序列(通常為啟動(dòng)子區(qū)域)插入報(bào)告基因載體,同時(shí)在實(shí)驗(yàn)細(xì)胞中共轉(zhuǎn)過表達(dá)該轉(zhuǎn)錄因子,可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)是否提高螢光素酶活性。
3.可供選擇的載體:

編號(hào)
可提供的載體名稱
1 pGL4.17[luc2/Neo] 信號(hào)通路報(bào)告載體
2 pLuc2-hRluc(pGL4.10-hRluc) 信號(hào)通路報(bào)告載體 雙熒光素酶luc2+hRluc
3 pGL3-hRluc 雙熒光素酶報(bào)告基因載體同時(shí)含有螢火蟲熒光luc+和海腎熒光Rluc
4 pGL3-basic 熒光素酶報(bào)告基因載體(螢火蟲熒光)
5 pmirGLO,pMir-Glo circRNA 3'UTR miRNA功能研究載體,熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)質(zhì)粒

聯(lián)系方式:400-681-8582
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